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这些载体用于在大肠杆菌和无细胞表达系统中通过T7 RNA聚合酶启动子进行HaloTag® 融合蛋白的诱导表达。表达水平高度依赖于蛋白质的特性，但是一般N- 末端HaloTag® 融合蛋白( 如pFN18A/ K，Cat.# G2751,G2681) 可以提高表达水平、增强复性，并提高所表达蛋白的溶解度。有两种类型的HaloTag® 载体：应用传统克隆方法的多克隆位点(MCS) 载体和Flexi® 系统载体。
Flexi® 载体系统是一种简单的蛋白编码序列的定向克隆方法。该方法建立在两种位点稀有的限制性酶 Sgfl 和 Pmel 基础上，可以将蛋白编码区在不同的 Flexi® 载体之间转换，而不需要重新测序，该方法快速，有效，保真度高。只有两个 N- 末端标记的载体或者从 N- 末端到 C- 末端的载体可以发生直接转化，多克隆位点载体和几个 Flexi® 系统载体带有 His6-HaloTag® 双重标签。这种双标签能够使用重复利用的镍树脂进行蛋白质纯化，保留了 HaloTag® 共价标记属性。
多克隆位点载体
pH6HTN His6HaloTag® T7 Vector (Cat.#G7971) 用于大肠杆菌和T7无细胞表达系统中具有N- 末端His6-HaloTag® 双标签蛋白的表达。pH6HTC His6HaloTag® T7 Vector (Cat.# G8031) 用于大肠杆菌和T7无细胞表达系统中具有C- 末端His6-HaloTag® 双标签蛋白的表达。
注意： Flexi® 载体带有致死性 barnase 基因，可以减少载体构建过程 中不带有插入片段的阴性克隆的产生。barnase 基因可被插入的目的 DNA 片段所替代。在没有插入目的DNA 片段的情况下，购买的此类载体无法在常用的实验用大肠杆菌菌株中生长。
生化试剂
