NanoBRET™ Target Engagement (TE) Intracellular BET BRD Assay 是测量完整细胞内化合物与BET 溴结构域靶蛋白结合的试验。该试验基于NanoBRET™ System 而建立。NanoBRET™ System 是一种用来测量活细胞内邻近分子间相互作用的能量转移技术。 NanoBRET™ TE BET BRD Assay 通过化合物竞争性地取代与 NanoLuc® BET BRD 融合蛋白可逆结合的NanoBRET™ Tracer( 示 踪剂 ) 的方法来分析待测化合物的表观亲和力。 NanoBRET™ TE Assay 使用15 个关键组分：与NanoLuc® 萤光素酶融和表达的细胞靶蛋白；与靶蛋白特异结合的可穿透细胞膜的荧光示踪剂；NanoLuc® 萤光素酶底物；不能透过细胞膜的 NanoLuc® 萤光素酶的抑制剂。BRET(Bioluminescence resonance energy transfer) 的实现过程是发光能量从NanoLuc® 萤光素酶转 移到与靶蛋白 -NanoLuc® 融合蛋白结合的荧光示踪剂上。作用于细 胞并与细胞内靶蛋白-NanoLuc® 融合蛋白特异结合的化合物会导致 BRET 的减弱。为确保对细胞内的靶向结合进行精确评估，需要使用 NanoLuc® 萤光素酶抑制剂减少操作过程中产生的破损细胞引起 的任何细胞外的NanoLuc® 信号，同时不影响健康活细胞内表达的 NanoLuc® 萤光素酶。
Promega公司拥有NanoLuc®萤光素酶(又称NanoLuc®荧光素酶)及底物相关专利。
NanoLuc®萤光素酶专利如下：
专利号：ZL 2010 8 0019477.4；专利公告号：102459579
NanoLuc®萤光素酶底物（Furimazine）的专利如下：
专利号：ZL 2011 8 0063659.6；专利公告号：103443121
专利号：ZL 2011 8 0062485.1；专利公告号：103370319
生化试剂
