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HDAC-Glo™ I/II Assays and Screening Systems (HDAC-Glo™ I/II 检测试剂盒及筛选系统 ) 是单试剂均质发光检测试剂盒,用于检测来源于细胞、细胞提取物或纯化酶类的第 I 类和第 II 类组蛋白去乙酰化酶(HDAC) 的相对活性。 HDAC-Glo™ I/II 检测试剂盒使用一种可渗透进入活细胞的乙酰化发光肽底物,该底物能被HDAC 的活性去乙酰化。氨基萤光素肽底物的去乙酰化可通过一个偶联的酶反应来检测;在这个反应中,显影试剂 (Developer Reagent) 中的蛋白酶可将去乙酰化的肽从氨基萤光素底物上切除下来,释放的氨基萤光素可用 Ultra-Glo™ 重组萤火虫萤光素酶反应来定量。该检测法可在15–45 分钟内完成,无需样品操作。HDAC 介导的发光信号持久,半衰期 大于3 个小时,可以用多孔板进行批量操作。HDAC 检测试剂盒可广泛应用于第 I 类和第 II 类酶。
曲谷菌素A (Trichostatin A)包含在HDAC-Glo™ I/II筛选系统内, 也可以单独购买,是一种已知的泛HDAC抑制剂,可用作阳性对照抑制剂。曲谷菌素 A 以溶于 DMSO 中的 10mM 的溶液形式提供。 HeLa 细胞核提取物(HeLa Nuclear Extract),包含在HDACGlo™ I/II 筛选系统内,也可以单独购买,可作为组蛋白去乙酰酶活性的来源。稀释的提取物也可用作 HDAC-Glo™ I/II检测试剂盒的对照。