32041 10 × HOLMES Buffer for Cas9（32041）

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32041 10 × HOLMES Buffer for Cas9（32041）

类目细分 : DNA标记·检测

合作品牌 : 吐露港

货期 : 咨询客服
- 价格：￥300.00
  
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- 顺丰
- 品牌：
- 吐露港生物
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- 5×1ml
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- 咨询客服
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商品参数

类目细分:DNA标记·检测
合作品牌:吐露港
货期:咨询客服

商品描述

产品描述

10 × HOLMES Buffer for Cas9 是适用于 Cas9 蛋白体外剪切反应的专用缓冲液。该反应缓冲液的成分经过优化，可有效提升 Cas9 蛋白的剪切活性，而不影响其检测靶标的特异性。常见的 Cas9 蛋白，如 SpCas9、 Sp-dCas9 和 Sp-Cas9 Nickase 等，均可使用 10 × HOLMES Buffer for Cas9 作为反应缓冲液。

产品组分

组分	32041-01
● 10 × HOLMES Buffer for Cas9	5×1 mL

保存条件

4℃储存；常温运输。

实验流程

以 SpCas9 体外剪切实验为例：

组分	体积	终浓度
10 × HOLMES Buffer for Cas9	2 μL	1 ×
10 μM SpCas9 Nuclease	0.5 μL	250 nM
10 μM sgRNA	0.5 μL	250 nM
1 μM Target DNA	0.5 μL	25 nM
Nuclease-free Water	Up to 20 μL

· 若用核酸电泳来分析剪切产物，对于 20 μL 剪切体系，推荐 target DNA 的使用量为 100-500 ng，且 target DNA 片段长度在 300 bp ~ 3kb 范围内。不同长度的 target DNA 需要的 Cas 酶和 sgRNA 的量需要根据 target DNA 的摩尔量计算，建议保持 Cas 酶：sgRNA:target DNA的摩尔比为 10：10：1，以尽量保证 target DNA 被剪切完全。实时荧光定量PCR仪检测荧光信号，37℃反应，每30 sec采集一次荧光信号。