癌症是当前世界困扰人类健康的重大疾病,目前尚未有良好的治疗手段。在抗肿瘤药物的研发过程中,细胞活性检测是必不可少的实验步骤,是衡量药效的重要指标。CTL试剂盒是以荧光素酶为基础开发的一种细胞活力检测试剂盒,目前已得到广泛的应用。
在紫杉醇(PTX)抑制胃癌细胞增殖的实验中,通过浓度梯度的紫杉醇处理胃癌细胞48h后,经过CTL试剂盒检测细胞活性,测得IC50值为5.553,选用此浓度通过不同载体释放紫杉醇后检测释放稳定性和作用时效,最后检测相关分子指标。
实验结果表明,在5.553μMol的浓度下,通过纳米材料载体缓慢释放有助于抑制胃癌细胞的增殖迁移。
在草本成分芍药苷(PF)的抗癌活性研究中,CTL试剂盒检测不同浓度PF处理下肺癌细胞(A549)和正常肺上皮细胞(BEAS)的活力。
从CTL检测结果可知芍药苷在2.412处半数抑制肺癌细胞的增殖,但对正常肺上皮细胞的活性抑制作用较低,表明其对肺癌细胞有相对特异性作用。随后通过对应IC50浓度处理下检测肺癌细胞的细胞迁移、及相关分子表达。
CellTiter-Luc Luminescent Cell Viability Assay Kit CTL试剂盒具有极简的操作步骤,通过一步法将检测液与待测细胞培养液1:1等体积混合(96孔板各100μL),室温震荡2-3min,随后室温下孵育10min,最后上机检测。
荧光素酶荧光可用发光检测仪或带化学发光检测模块的酶标仪直接检测。如:Modulus™ 单管型多功能检测仪、Modulus™ II 微孔板型多功能检测仪,Glomax Discover 多功能检测仪、SpectraMax Gemini EM 荧光酶标仪、Luminometer发光计、多功能酶标仪或者其他能够检测生物发光的仪器等。
检测设置:Luminescence,350-700 nm,建议检测时间设为2-10 sec。萤火虫萤光素在氧化过程中发出560nm左右的生物荧光,海肾萤光素在氧化过程中发出480nm左右的生物荧光。
CTL试剂盒是当前常用的细胞活力检测工具,提供精准的检测结果和简洁的实验方案,在抗癌药物的研发过程中发挥重要作用。