药物作用分析是开发新药的重要技术手段，涉及到癌症、免疫、心血管等众多研究领域。其检测方法多样，当前综合效果最好的属于荧光素酶检测系统。CellTiter-Luc Luminescent Cell Viability Assay  （CTL）是一种基于荧光素酶而开发的细胞活力检测试剂盒，是目前使用体验最好，操作最为简便，灵敏度最高的检测方法之一。

实际案例分析

案例1

在关于植物萃取的某黄酮化合物对心肌细胞的保护作用研究中，通过不同浓度梯度的马苷碱处理高糖心肌细胞损伤模型和低糖心肌细胞对照模型后，计算EC50 ，检测其对心肌细胞的保护作用。随后用EC50对应的浓度处理高糖条件下心肌细胞24h后，WB检测细胞损伤、凋亡等相关分子的表达量，tunel染色检测细胞凋亡状态。

Figure 1通过CTL试剂盒检测EC50

研究结果表明，在0.001289μmol/L浓度下，处理24h，该黄酮化合物对高糖损伤下的心肌细胞有较好的保护作用。

案例2

在植物提取物紫檀苷抑癌作用的研究中，通过浓度梯度的紫檀苷处理指数生长期的细胞24小时后，通过CTL试剂盒检测其细胞活性，计算IC50，证明对癌细胞的杀伤作用。随后用IC50浓度的紫檀苷处理体外培养的3D实体瘤模型。

Figure 2不同浓度梯度下紫檀苷对肿瘤细胞的抑制作用

在IC50浓度下处理24h后，通过trans-well、细胞划痕、活性氧水平检测、线粒体膜电位检测等实验检测细胞增殖迁移及氧化应激，最后通过tunel染色检测细胞凋亡情况。

研究结果表明，紫檀芪通过显著增加ROS堆积，抑制Nrf2/ HO-1 表达，从而有效抑制结肠癌细胞的增殖、转移 和侵袭。

使用说明

CTL试剂盒具有极简的操作步骤，通过一步法将检测液与待测细胞培养液1：1等体积混合（96孔板各100μL），室温震荡2-3min，随后室温下孵育10min，最后上机检测。

检测仪器

荧光素酶荧光可用发光检测仪或带化学发光检测模块的酶标仪直接检测。如：Modulus™ 单管型多功能检测仪、Modulus™ II 微孔板型多功能检测仪，Glomax Discover 多功能检测仪、SpectraMax Gemini EM 荧光酶标仪、Luminometer发光计、多功能酶标仪或者其他能够检测生物发光的仪器等。检测设置：Luminescence，350-700 nm，建议检测时间设为2-10 sec。萤火虫萤光素在氧化过程中发出560nm左右的生物荧光，海肾萤光素在氧化过程中发出480nm左右的生物荧光。

总结

CTL适用于多种细胞在不同分子不同研究领域下的细胞活性检测，通过CTL试剂盒检测细胞健康状态，有助于当前肿瘤药物、健康保健药物的开发。